Plant organska materija je sastavljena od mnogo stanica , od kojih svaki sadrži DNA koji drži upute za rast i funkciju . Znanstvenici možda žele studirati dio ili sve od genetskog materijala prisutnog u stanicama , pa je potrebno da se sigurno izvući DNK iz konstrukcijskog materijala i strojeva stanica koja okružuje it.Things morat ćete
2 grama lišća
tučak i žbuka pregled centrifuge katalog vodenoj kupelji katalog ravnotežu katalog gaza katalog Šest 15ml centrifuge cijevi
Jedan 1,5 ml eppendorftubici
100ml CTAB Vađenje tampon Free 2 ml Beta – merkaptoetanol
7 ml 24 : 1 kloroform : izoamilnog alkohola smjesa pregled 50 mikrolitara RNaze A u koncentraciji od 10 mg /ml pregled pipete pregled 6 ml izopropanola pregled 2ml 70% etanola pregled Sterilna 1 ml deionizirane vode
Screenshot pokazati više uporabu Screenshot pregled, 1

Napunite vodenoj kupelji na preporučenu razinu s vodom , koja varira sa specifikacijama svakog proizvođača , i uključite ga . Postavite vodenoj kupelji do 65 stupnjeva Celzija i ostavite ga da dođe do temperature . Postavite izopropanolski posudu na led . Postavite centrifuge na 3000 okretaja u minuti , na temperaturi od 20 stupnjeva Celzija .
2

Vaganje 2 g ostavlja na ravnoteži i stavite ih u mužaru . Dodati dovoljno beta-merkaptoetanola pomoću pipete spremnik pufera za ekstrakciju da konačni proizvod se sastoji od jednog do dva posto beta-merkaptoetanola . Na primjer , ako imate volumena pufera koji mjeri oko 100 ml , a zatim dodati 2 ml beta- merkaptoetanol na spremnik i temeljito promiješati .

3

pipetom 7 ml tampon ekstrakcija u mort . Razbijati mješavinu u homogenu tekućinu s tučka .
4

fold komad gaze više u obliku četiri sloja . Procijedite i iscijediti tekućinu kroz slojeve u 15 – ml epruvetu za centrifugiranje .
5

Stavite cijev u vodenoj kupelji za 30to 60 min Ute . Vrtlog cijev miješati njezin sadržaj svaki četvrt sata . Dopustitecijev da se ohladi na sobnoj temperaturi , nakonpuna vremensko razdoblje je gore .
6

Najbolje secijev s kloroformom i izoamilnog alkohola smjesu ( to sadrži 24 dijelova kloroforma na jedan dio izoamilnog alkohola ) , tako cijev sadrži otprilike pola uzorka i pola novi tekući dodatak . CAP-u cijev i okrenuti ga naopako nekoliko puta polako tako da mješavina tekućina .
7

Stavite cijev u centrifugu i neka ga vrtjeti 10 minuta .
8

Mjesto 50 ml RNaza A u novu epruvetu za centrifugiranje . Pipetom supernatant (jasno sloj na vrhu cijevi iznad bijelim slojem krhotina ) u prvoj cijevi off i premjestiti u drugu cijev . CAP-u cijev i preokrenite ga nekoliko puta da se miješati sadržaj zajedno . Držite cijev na sobnoj temperaturi sat vremena .
9

Izvedite korake 6 i 7 opet dva puta , tako da imate jasan uzorak cijev . Zatim pipetom do 9 ml bistre tekućine iz konačnog cijevi u novu cijev . Doda se 6 ml izopropanola i invertni epruvete 10 puta na nježan način , tako DNA ispadne iz otopine , a u obliku krutine . Zatim centrifuge cijev za 10 minuta , što bi trebalo stvoriti kuglica DNA u dnu cijevi .
10

odliti tekućinu u cijevi , takopeleta ostaje . Pipeta se u 2 ml 70 % etanola i mjesto natrag u centrifugi tijekom pet minuta . Odliti tekućinu dio opet . Koristite sterilne pipete pokupiti peleta i premjestiti ga sterilnom 1,5 ml – Eppendorf tube . Pipeta u 200 mikrolitre sterilne deionizirane vode i pustitiDNK otopiti u potpunosti u tekućini , koji se može uzeti preko noći . Uzorak je tada spreman za analizu .