replikacije kromosoma , prerade messenger RNA , prijevod proteina i ključnih odluka u ranim fazama razvoja ovise o interakciji DNA , RNA i proteina . Ove interakcije su osnovni biološki procesi ekspresiju gena i sintezu proteina . Znanstvenici često koriste Saccharomyces cerevisiae, ista vrsta kvasca koji se koriste u pečenje i piva , za proučavanje gena koji kodiraju specifičnim proteinima i analizirati interakcija između proteina i drugih molekula . Kvasac tri hibridni sustav je jedan od tri varijante kvasca dva hibridna sustava koji se koristi za proučavanje tih interakcija . Dvohibridni sustav

Postupak Dvohibridni se koristi za detekciju interakcija protein – protein izgleda za ekspresiju reporterskog gena . Mnogi proteini imaju najmanje dvije domene , ili diskretne strukturne i funkcionalne jedinice . GAL4 , protein koji se nalazi u Saccharomyces cerevisiae , ima DNA veznu domenu ( dbd ) i aktivacijska domena ( AD ) . U ovom postupku , jedan hibridni protein fuzioniran na DBD , a drugi na AD . Ne reporterski gen izražen fuzijom samo jedan od hibrida . Odgena GAL4 novinar je izrazio samo ako su prisutna oba hibrida , protein-protein interakcija je naznačeno .
Tri – Hybrid
sustav

tri hibridna metoda identificira reporterski gen detektirati interakcije proteina s RNA . Prvi hibridni protein koji se sastoji od DBD spojenog direktno na RNA vezne domene . Druga se sastoji od AD faktora transkripcije GAL4 povezan s RNA vezujućeg proteina . RNA vezne domene interakciju s hibridna molekula RNA koja povezuje dva hibridni protein u obliku kompleksa . Formiranje kompleksa aktivira ekspresiju GAL4 reporterskog gena . Od reporterskog gena uključena samo formiranje tri hibridnog kompleksa , njegova prisutnost ukazuje na interakciju RNA i proteina .
Jedno-hibridnom sustavu

metoda jedan hibridni se koristi za detekciju proteina interakcije s DNA . Jedan hibridni sustav osigurači jedan protein koji povezuje AD izravno na DBD . Umjesto identificiranje reporterski gen , ova metoda traži određeni protein koji moraju prepoznati ciljnu sekvencu DNA . Prisutnost specifičnih proteina pokazuje interakcije proteina s DNA .
Jedan – dvo-hibridni sustav

jedan do dva hibridna metoda se koristi za proučavanje -proteina proteina i protein – DNA interakcije istovremeno . Korištenje novorazvijenih kvasaca , ova metoda koristi GAL4 reporterski gen za identifikaciju interakcija protein – protein i p53 konsenzus identificirati protein – DNA interakcije . Metoda se očekuje da će znatno povećati preciznost eksperimentalnih rezultata smanjuje pojavu lažno pozitivnih nalaza dobivenih u drugim hibridnih sustava .