SDS – PAGE jepostupak znanstvenici koriste na odvojenim proteina temelji se na tome da migriraju kroz gel . Gelovi su izrađene od polimera pod nazivom poliakrilamid . Kada bi poliakrilamidni gel , što počnete s mješavinom kemikalija : akrilamida , bisakrilamid , SDS i tampon kemikalija stabilizira pH . Dodavanje persulfat spoja i drugim kemijskim nazivom TEMED će uzrokovatiakrilamida u obliku dugih lanaca i polimeriziraju . Inicijacija

persulfate ion u amonijev persulfate jeekvivalent od dva sulfat iona povezanih sa slabom kisik-kisik . Ta veza može prilijepiti ili razbiti na dva dijela , čime sulfat radikala — visoko reaktivne molekule s neparnim elektrona . Sulfat radikal može reagirati s vodom za generiranje hidroksilni radikal , ili može reagirati s monomera akrilamida za početak reakcije polimerizacije . TEMED djeluje kao katalizator koji ubrzava brzinu kojom Persulfate ioni formiraju radikala .
Lančana reakcija

Nakonhidroksilne ili sulfat radikalna je formirana , ona napada je akrilamida monomer , uzimanje jednog elektrona u dvostruke veze . Akrilamid monomer je sada radikal s neparnim elektrona , pa ide na napad drugog monomera akrilamida na sličan način . Ovaj niz događaja stvara brzo – rastući lanac akrilamidne monomera povezanih pojedinačnih obveznica . Lančana reakcija samo završava kada se dvije radikali reagiraju jedni s drugima .
I umreživanje

Ako akrilamida bili prisutni na vlastitu , to ne bi formirati debeli gel trebate za SDS -PAGE . Polimeri moraju biti poprečno povezani tako da tvore gel sa pravim svojstvima , a to je , gdje dolazi bisakrilamid u. dvostrukih veza u bisakrilamid također poslužiti kao meta za radikale u reakciji , a zato što ima dva mjesta na kojima se može napadnut od strane radikala , to je u konačnici ugrađena u dva od rastućih polimera . Posljedično, polimeri završiti s poprečnih veza između njih na slučajnim mjestima duž dužine svakog lanca .

Razmatranja

polimerizacije reakcija je vrlo brzo , tako da nakon što ‘ ve dodao TEMED i persulfate , održat će se vrlo brzo . Čistoća vaših reagensa je važno jer zagađivači mogu utjecati na rezultate . Akrilna kiselina , na primjer , može se dodati u polimer a stvara ionsko – izmjenjivačke stranice koje bi mogle uzrokovati lokalnu varijacije pH u raznim gelu . Rezultirajući gel još uvijek mogu sadržavati neke akrilamida monomera i akrilamida jeneurotoksin , tako da uvijek poduzeti odgovarajuće mjere opreza pri radu s SDS gelova .