Kako smanjiti nespecifično vezanje na spremnike

u imunokapacitet vezanja u spremniku ili u jažice mikroploče je veća od količine proteina stavljena u spremnik ili bunara . Za smanjenje ili sprečavanje antitijela ili druge vrste molekula proteina i apsorbira na spremnik ili bunara , pokus se mora ispere prikladnim puferom i specifično blokirajuće reagens mora se dodati . Vrsta tampon ireagensa za blokiranje odabrati ovisi o vrsti eksperimentalnih assay.Things morat ćete
posudica
Buffer rješenje
reagensa za blokiranje
pipetu koja Screenshot Antigen
antitijela

Prikaži MoreInstructions
1

Premažite posudica s antigena . Koristite antigena razrjeđivanje . Čiste otopine antigena nije potrebna , jer je samo oko 3 posto od proteina u uzorku je ciljni protein . Kad razrjeđivanje , da bi se osiguralo da uzorci sadrže antigen u koncentraciji koja je u rasponu detekciju antitijela . Pipetu koja Antigen razrjeđivanje rješenje prema dolje ploča bunara . Neke ploče mogu biti prevučene s antigenom . Pročitajte upute isporučene s ploča bunara .
2

Pokrijte tanjure s plastike i ljepila inkubiraju preko noći. Pranje ploče s puferskim otopinama , kao što su Tris – puferiranoj fiziološkoj otopini ili fiziološkoj otopini s fosfatnim puferom. Oprati , isprati tanjure pomoću iscijediti bocu napuni pufer otopini preko laboratorijski sudoper . Pat ploče s papirnatim ručnikom kako bi ukloniti sve preostale kapi otopine pufera .
3

Smanjitenespecifično vezivanje proteina i molekula koriste tampon blokiranje ili reagensa , kao što je deterdžent blokator , mlijeko u prahu ili goveđeg seruma . Tip blokiranja reagens ovisit će o testu . Dodavanje reagensa za blokiranje u jažice pipetom . Ponovno pokrivaju ploču s ljepljivim plastičnim i inkubira se preko noći .
4

su ponovo opere posudica korištenjem pufera. Ovi koraci se smanjiti količinu nespecifičnog vezanja koje se može pojaviti u jažice ploče prije dodavanja otopine antitijela potrebnih za postupak . Osim toga, blokirajući reagensi može pomoći u smanjivanju pozadinske boje u rezultatima testova .

Odgovori